|
El cáncer de próstata (CaP) es el segundo cáncer más frecuente en varones. Actualmente, los métodos de diagnostico para CaP se basan en la práctica de biopsias tisulares. Algunos estudios moleculares mostraron una expresión de miRNAs alterada en el tejido de tumor prostático comparado con controles normales. Curiosamente, el plasma seminal (PS) contiene una concentración extraordinaria de miRNAs, algunos de ellos específicos de las glándulas reproductoras que lo originan, como la próstata. Los miRNAs en PS se encuentran contenidos en los exosomas y libres unidos a proteínas. OBJETIVO Comparar el perfil de expresión de los miRNAs del PS total y de los miRNAs que contienen los exosomas en CaP. MATERIAL Y MÉTODOS Se estudiaron especímenes seminales de 8 individuos con CaP diagnosticada. Se incluyeron como grupos control 4 individuos vasectomizados, dado el número creciente de individuos que se someten a esta técnica anticonceptiva, y 4 individuos fértiles normozoospérmicos. El semen se centrifugó para eliminar las células y restos celulares. Se dividió en dos alícuotas, una de las cuales se filtró (0,2µ) y se ultracentrifugó para obtener los exosomas. El RNA se aisló del PS total y de los exosomas (miRCURY RNA Isolation kit-cell&plant). Se analizó la expresión de 9 miRNAs (uno de ellos se utilizó como normalizador) mediante RT-qPCR utilizando el kit miRCURY LNATM Universal RT miRNA (Exiqon) y el Lightcycler 96 (Roche). Se calculó el CV de los datos para seleccionar el miRNA normalizador y los valores relativos de expresión se determinaron mediante la estrategia 2ddCq. Para el análisis estadístico se utilizó la prueba no paramétrica Mann-Whitney. RESULTADOS El perfil de expresión de los miRNAs analizados es diferente entre el PS total y en los exosomas en los diferentes grupos de estudio. Además, algunos de los miRNAs (3/9) no se detectan en PS total, pero sí en los exosomas de individuos vasectomizados. CONCLUSIONES Se propone el estudio de los niveles de expresión de los miRNAs tanto en PS total como en los exosomas para evaluar su utilidad como biomarcadores no invasivos del CaP. Además se sugiere considerar la presencia de vasectomía en dichos estudios. PALABRAS CLAVE Cáncer de próstata, plasma seminal, miRNAs. FINANCIACIÓN Proyecto FIS-FEDER PI15/00153.
|